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第十九章 王桂兰是我妈(2 / 2)

卢赫一脸不可置信地凑上前。一张一张电泳图谱翻过,他的眉头逐渐蹙成一团。</p>

那些灰黑色底色的图片上,有的是一条亮线,有的是3条,有的是多条,有的颜色稀碎像一幅胡乱渲染的水墨画。</p>

“这个3条的是哪个样本的?”卢赫指着屏幕问。</p>

“当然不是2号,否则我会愁成这样吗?”菜菜抱胸倚靠着桌子,一脸疲惫道:“你设计的3种剪切方式,第一种在靶标基因上下游各切一次,然后给出HDR模板,同源修复。第二种,在靶标基因内切一次,造成移码突变,末端连接。第三种,在靶标基因上游敲入一个终止子,然后给出HDR模板,同源修复。”</p>

“用软件进行脱靶分析的时候,这三种方法的数值都相当不错。1号82分,2号77分,3号69分。一般来说,超过60分的都具有操作可行性。可是电泳结果你也看到了,1号要么一条亮带要么稀碎,2号要么多条要么稀碎,3号全都只有一条亮带。”</p>

“总结来说就是,全脱靶,剪切效率0%。”菜菜嘟着嘴,接着补充道:“我合成了多个RNP,也电泳了多次,结果都大差不差。最好的情况是1号有一次泳出了个38%的剪切效率,能用,但风险太大。给龟做导入可不比蜥蜴容易,导完了之后没效率,那不是白折腾吗?”</p>

卢赫的手又抚上了他下巴上并不存在的胡须,思考片刻,幽幽开口,“再来一次。”</p>

“啊?”菜菜疑惑不已。</p>

“再来几次。泳出38%的RNP再泳几次,同时再合成一个1号的RNP,看看效率。”</p>

菜菜不可思议极了,“结果肯定是一样的啊。我用的是一样的试剂,同一把移液枪,调的时候都是从大往小调,我需要800μl时,都是先调到1000μl再回拨。该换枪头的时候我都换了,我真没出错。”</p>

“我没说你出错。你能泳出一个38%,那肯定是有道理的。可能是那一次碰巧有一部分RNP结合到了正确的位置,发挥了一点正确的作用。总体结果再离谱都无所谓,只要有一次效率能上60%,我们就可以拿那一次的RNP去导入。”</p>

“你这不是异想天开吗?”菜菜更加费解了,“就算有一次碰巧碰上了60%,你也保证不了你导入的时候它效率还能有这么高啊!”</p><div id='gc1' class='gcontent1'><script type='text/javascript'>try{ggauto();} catch(ex){}</script>

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